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            Turbo

            文字:[大][中][小] 2016-9-22    瀏覽次數:4969    

            Turbo Chemically Competent Cell 產品說明書




            產品規格(CAT#: DL1081)

            Turbo:                                                     100μl/支

            pUC19 (control vector,10pg/μl):                   10μl

            保存條件(保質期):                            -80℃(6個月) 



            基因型

            F' proA+B+ lacIqΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10) TetS endA1 thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5

             

            產品說明

            Turbo菌株是生長最快的大腸桿菌菌株。平板上6.5小時可見克隆,營養液中搖菌4-6小時可提取質粒,缺失核酸內切酶 (endA),提高了質粒DNA的產量和質量;Turbo菌株可嚴格控制laclq的表達,可以克隆毒性基因;fhuA2突變賦予Turbo菌株對噬菌體T1的抗性;lacZΔM15的存在使Turbo可用于藍、白斑篩選。Turbo感受態細胞經特殊工藝制作,pUC19質粒檢測轉化效率>5×108 cfu/μg DNA。

             

            操作方法

            1. Turbo感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蜻B接產物)

            并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

            2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。

            3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (SOC或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。

            4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的SOC或

            LB培養基上。

            5. 將平板倒置放于37℃培養6.5小時以上。

             

            注意事項

            1. 感受態細胞最好在冰中緩慢融化。插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。

            2. 混入目的DNA時應輕柔操作。

            3. 轉化高濃度的質?;蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。





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            Turbo Chemically Competent Cell 產品說明書


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