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            新品推薦

            JM108

            文字:[大][中][小] 2018-8-13    瀏覽次數:5972    

            JM108 Chemically Competent Cell 產品說明書 




            產品規格(CAT#: DL1022)

            JM108:                                                     100μl/支

            pUC19 (control vector,10pg/μl):                   10μl

            保存條件(保質期):                            -80℃(6個月) 


            基因型


            F- endA1 recA1 gyrA96 thi-1 relA1 glnV44 Δ(lac-proAB) hsdR17 (rK- mK+) 


            產品說明

            JM108來源于JM106菌株,最初是作為黏粒文庫的宿主被改造而成。 JM108菌株缺失核酸內切酶 (endA),提高了質粒DNA的產量和質量;重組酶缺陷型 (recA)減少插入片段的同源重組概率,保證了插入DNA 的穩定性。JM108菌株最大的特點是擴繁質粒產量大,純度高,且質量穩定,特別是超螺旋質粒比例較高,超螺旋質粒所占比例一般>90%(gyrA96突變型說明JM108菌株的DNA-gyrase 基因被突變,導致拓撲異構酶Ⅱ的功能受影響,增加了超螺旋質粒的比例),非常適合后續的動物細胞轉染實驗(超螺旋質??商岣呒毎D染的效率)。此外該菌株具有萘啶酸抗性。唯地生物開發的JM108感受態細胞經特殊工藝制作,pUC19質粒檢測轉化效率>0.5×109 cfu/μg DNA。


            操作方法

            1. JM108感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蜻B接產物)并用手撥打EP管底混勻,冰中靜置25分鐘。

            2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。

            3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇70分鐘。

            4. 5000 rpm離心1分鐘收集菌體,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的培養基上。

            5. 將平板倒置放于37℃培養箱至少13小時。


            注意事項

            1. 感受態細胞最好在冰中緩慢融化。插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。

            2. 轉化高濃度的質?;蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。




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            JM108 Chemically Competent Cell 產品說明書
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